• česky
  • english

RIV/68378050:_____/09:00317965 - Methods for viral RNA isolation and PCR amplification for sequencing of near full-length HIV-1 genomes (2009)

Údaje o výsledku
Identifikační kódRIV/68378050:_____/09:00317965
Název v původním jazyceMethods for viral RNA isolation and PCR amplification for sequencing of near full-length HIV-1 genomes
Název českyMetody RNA isolace a PCR amplifikace pro sekvenaci téměř celých genomů HIV-1
DruhJ - Článek v odborném periodiku
Jazykeng - angličtina
OborEB - Genetika a molekulární biologie
Rok uplatnění2009
Kód důvěrnosti údajůS - Úplné a pravdivé údaje nepodléhající ochraně podle zvláštních právních předpisů
Počet výskytů výsledku1
Tvůrci výsledku
Počet tvůrců celkem4
Počet domácích tvůrců1
TvůrceKemal K. S. (státní příslušnost: US - Spojené státy americké)
TvůrceReiniš Milan (státní příslušnost: CZ - Česká republika; A - domácí tvůrce; G - garant výsledku)
TvůrceWeiser B. (státní příslušnost: US - Spojené státy americké)
TvůrceBurger H. (státní příslušnost: US - Spojené státy americké)
Údaje blíže specifikující výsledek
Popis v původním jazyceHIV-1 in plasma represents the viral quasispecies replicating in the patient at any given time. Studies of HIV-1 viral RNA from plasma or other body fluids therefore reflect the virus present in real time. To obtain near full-length genomic sequences derived from virion RNA it is first necessary to carefully isolate and amplify the RNA.The procedure described below, involves viral RNA extraction, reverse transcription (RT) of the extracted RNA to produce cDNA copies, and PCR amplification of long HIV-1 gene fragments using site-specific, overlapping primers. The primers are based on subtype B HIV-1 strains, and plasma specimens are used in the procedures. However, the protocol can easily be adapted to other HIV-1 subtypes by modifying the primers to match the subtype of interest.
Popis českyHIV-1 se replikuje v plasmě v průběhu virové infekce. Studia RNA z plasmy a dalších tělních tekutin proto reflektuje varianty viru v reálném čase. K získání genomových sekvencí odvozených z virové RNA je nutno nejprve amplifikovat RNA. V tomto článku jsou popsány metody RNA extrakce, její reversní transkripce na cDNA a amplifikace dlouhých DNA fragmentů za použití sady specifických primerů tak, aby vznikaly vzájemně se překrývající fragmenty DNA. Primery byly odvozeny ze sekvencí HIV-1 subtypu a metodika optimalizována na isolaci vzorků z plasmy. Nicméně protokol může být snadno upraven modifikacím použitých primerů na studium dalších HIV-1 subtypů.
Klíčová slovaHIV-1 viral RNA; HIV-1 primers; long RT-PCR
Název periodkaThe Nucleus, Volume 1: Nuclei and Subnuclear Components
ISSN1064-3745
Svazek periodika485
Číslo periodika v rámci uvedeného svazku-
Stát vydavatele periodikaUS - Spojené státy americké
Počet stran výsledku12
Údaje o tomto záznamu o výsledku
PředkladatelÚstav molekulární genetiky AV ČR, v. v. i.
DodavatelAV0 - Akademie věd České republiky (AV ČR)
Rok sběru2009
Systémové označení dodávky datRIV09-AV0-68378050/01:1
Datum dodání20.8.2009
SpecifikaceRIV/68378050:_____/09:00317965!RIV09-AV0-68378050
Kontrolní kód[F581626ABF79]
Jiný výskyt tohoto výsledku se v RIV nenachází
Odkazy na výzkumné aktivity, při jejichž řešení výsledek vznikl
Výzkumný záměrAV0Z50520514 - Molekulárně genetické a buněčné základy klíčových biologických procesů: genová exprese, onkogeneze, replikace virů, imunita a vývoj organismů (2005-2011, AV0)